Cromatografia

La cromatografia è una delle tecniche di laboratorio più importanti utilizzata per la separazione e / o analisi chimica di miscele complesse. Si è in gran parte attuato in discipline scientifiche quali la chimica e scienze della vita, soprattutto in biochimica. Cromatografia deriva dalle parole greche, 'color' chroma significato e il significato graphein 'a scrivere'. Il credito per inventare cromatografia va al botanico russo, Mikhail Semyonovich Tsvet, che lo utilizzarono per la prima volta nel 1901, mentre stava conducendo delle ricerche sui pigmenti vegetali. In seguito, molti altri scienziati hanno sviluppato diversi metodi di cromatografia seguendo i principi di base.

In ogni metodo di cromatografia, vi sono due fasi: la fase stazionaria o il materiale di impaccamento della colonna (solido o liquido) e la fase mobile o il solvente (solitamente liquido o gas). Fase stazionaria si riferisce al letto o sostanza di supporto che sono fissi, mentre fase mobile si riferisce al mezzo, attraverso il quale la miscela da separare muove in una direzione particolare. La miscela viene separata da distribuire le sue molecole che la compongono tra le due fasi. La distribuzione può avvenire sulla base della loro struttura, dimensione, forma, carica o peso molecolare. La cromatografia può essere 'analitica' o 'preparativo' in base al principale obiettivo per il quale è stata seguita. Cromatografia analitica fa uso solo di una piccola quantità di una miscela e determina i componenti di tale miscela particolare. Cromatografia preparativa, invece, è seguita come un processo di purificazione, dove vengono separati i componenti di una miscela e utilizzato per ulteriori studi.

Metodi di cromatografia sono ulteriormente classificati a seconda tre fattori: tipo di fase stazionaria, media della fase mobile e il meccanismo di separazione. Vediamo in ognuno di classificazione e loro tipi.

Classificazione basata su fase stazionaria: I metodi cromatografici sono classificati sulla base della forma della fase stazionaria. Esistono fondamentalmente due metodi: prima cromatografia su colonna, dove la fase stazionaria è in forma di un tubo e la seconda è cromatografia planare, in cui la fase stazionaria è in forma di piano o presente su un supporto piano.

Classificazione base Fase mobile: metodi cromatografici sono inoltre classificati a seconda del liquido della fase mobile. Ci sono due metodi in questa categoria e sono la gascromatografia e la cromatografia liquida. Il mezzo fase stazionaria utilizzato sia per il gas e metodi di cromatografia liquida è liquido o solido.

Classificazione base meccanismo di separazione: In questa categoria, i metodi cromatografici sono classificati in base a come le molecole componenti della miscela sono separati. I vari metodi cromatografici in questa categoria comprendono: cromatografia di adsorbimento, cromatografia di partizione, cromatografia a scambio ionico, cromatografia di affinità e cromatografia di esclusione.

Cromatografia tecnica ha molti vantaggi rispetto ad altre tecniche in studi analitici. È molto sensibile ed affidabile (a condizione che il metodo viene eseguito accuratamente senza alcuna contaminazione). Il vantaggio principale è che la miscela complessa possono essere separati con precisione utilizzando solo pochi microgrammi del campione. Inoltre, la separazione richiede meno tempo rispetto ad altre tecniche. L'altro vantaggio è che le attrezzature messe a punto sono semplici e facili. Grazie a questi vantaggi, la cromatografia è diventata una tecnica importante per la scienza forense e altri studi clinici. Lo svantaggio della cromatografia è che, poiché il metodo è molto sensibile, la configurazione errata o della contaminazione, anche in nanogrammi, darà risultati diversi.